Коэффициенты метаболизма моноаминов в мозге крыс приведены в таблице 3. Отмечено достоверное увеличение коэ
Результаты измерения содержания моноаминов в головном мозге крыс приведены в таблице 2. В группе гепатоз + Гептрал наблюдается достоверно увеличение содержания дофамина и серотонина в мозге. Оба препарата не оказали влияния на содержание в мозге норадреналина и ГВК. Однако в группе метионина отмечено достоверно увеличение содержания ДОФУК и 3-МТ (относительно контроля).
Результаты влияния SAM и метионина на биохимические маркеры гепатоза показаны в таблице 1. В группе гепатоза наблюдается достоверное увеличение в сыворотке (относительно контрольной группы) уровня активности печеночных ферментов, выделяющихся в кровь при разрушении гепатоцитов [8]: АЛТ (в 10 раз), АСТ (в 7,5 раз) и ГГАТ (в 2,7). Отмечено достоверное уменьшение в группах гепатоз + Гептрал и гепатоз + метионин (относительно группы гепатоза) активности печеночных ферментов для АЛТ (в 5 раз и 5,2 раз), для АСТ (в 6,2 и 7,0 раз), соответственно, а для ГГАТ (в 1,8 и 2,4 раз).
Результаты и обсуждение
Статистическая обработка полученных данных проводилась при помощи компьютерной программы Statistica v. 6.0 по критерию Манн-Уитни, т.к. объем выборки был небольшим (n=6); различия считались достоверно значимыми при p<0,05.
Кровь центрифугировали при 5000 g 10 минут для получения сыворотки, которую замораживали до последующего определения активности ферментов аланинаминотрансферазы (АЛТ), гамма глутамиламинотрансферазы (ГГАТ), аспартатаминотрансферазы (АСТ), щелочной фосфатазы (ЩФ) и с помощью тест – наборов “Biolatest” (“Pliva-Lachema”, Чехия) на спектрофотометре “Hitachi 557” (Япония).
Анализ гомогенатов мозга на содержание моноаминов проводили методом ВЭЖХ с электрохимическим детектированием, как описано у Чумакова и др. [18] Анализ гомогенатов мозга на содержание SАМ проводили методом ВЭЖХ c УФ-детектированием как описано у Simon and Shalchi [16].
Хронический гепатоз вызывали пероральным введением четыреххлористого углерода (ССl4) в дозе 1000мг/кг веса тела (50% раствор в оливковом масле) 5-ти кратно через каждые 3 дня (т.е. в 1,4,7,10,13-й день) [8]. ССl4 вводился в 16 часов с целью увеличения активности микросомального цитохрома P 450. Предватительно животные голодали в течение 12 часов (вечером лишались пищи) [10]. Контрольной группе вводили эквивалентное количество оливкового масла. Гептрал (S-аденозил-L-метионин) и метионин вводились внутрибрюшинно в дозе 300мг/кг веса тела ежедневно [2]. На 14 день эксперимента животных забивали декапитацией, собирали кровь и извлекали головной мозг (без мозжечка). Мозг выделяли, как описано у Чумакова и др.[18] для последующего определения содержания НА, ДА, 5-ГИУК, серотонина, ДОФУК, 3-МТ, ГВК, SАМ.
В исследовании использованы самцы крыс линии Spague-Dawley массой 280-300 грамм. Крысы содержались в стандартных условиях вивария с 12-ти часовой синхронизированной сменой светового и ночного периода. Основные правила содержания и ухода соответствуют нормативам, данным в Guide for Care and Use of Laboratory Animals (ILAR publication, 1996, National Academy Press). Животные получали стан дартный корм для грызунов (ПК-120-1) и воду adlibitum.
S-аденозил-L-метионина p - толуолсульфонатная соль (SAM), (“Sigma-Аldrich”, CША), гептрал (“Эббот” С.П.А., Италия), L-метионин (“Alfa Aesar”, Великобритания), L-норадреналин (НА), L-дофамина гидрохлорид (ДА), 5-гидрокси-3-индолуксусная кислота (5-ГИУК), 5-гидрокси-L-триптофан (серотонин), 3,4 - дигидроксифенил уксусная кислота (ДОФУК), гомо-ванилиновая кислота (ГВК), 3-метокситриптамин (3-МТ) (“Fluka”, Швейцария)
Целью данной работы являлось изучение воздействия хронического введения SAM и метионина на метаболизм моноаминов в мозге крыс на модели хронического гепатоза.
К настоящему времени, наиболее изучено острое влияние SAM на обмен моноаминов в мозге крыс [9,12,14,7], однако его влияние при хроническом введении практически не исследовано. Также не изучено влияние SAM на обмен моноаминов в мозге при сопутствующей патологии печени.
Схема метаболизма серотонина: Серотонин--> 5-ГИУK;
Схема метаболизма дофамина: ДA-->3-МТ-->ДОФУК-->ГВК;
S-аденозилметионин (SAM) метаболит, имеющийся во всех живых клетках, играющий важную роль как агент трансметилирования, транссульфирования и аминопропилирования [4]. Он образуется из метионина и АТФ. Его участие во многих биохимических процессах послужило основанием к проведению экспериментальных и клинических исследований с целью изучения его эффективности при различных патологических состояниях. Результатом этих исследований стало появление в терапевтической практике нового лекарственного препарата «Гептрал», введенного как гепатопротектор. В последствии у него была выявлена противовоспалительная, анальгетическая, хондропротекторная и антидепрессивная активности [4]. Имеются данные, указывающие на связь концентрации SAM в мозге с развитием неврологических заболеваний: шизофренией, болезнью Альцгеймера, деменцией [1,5,11]. Высокая биологическая активность SAM способствовала возникновению интереса к изучению его влияния на обмен моноаминов в мозге. Экспериментальные работы, проведенные на животных посвященные изучению влияния SAM на различные звенья метаболизма моноаминов, дают противоречивые результаты. Имеются работы, показывающие увеличение содержания норадреналина [9,12] и серотонина [14,7] в мозге крыс при введении SAM. Помимо увеличения содержания нейромедиаторов отмечают также увеличение содержания продуктов метаболизма моноаминов в мозге (например, метаболита серотонина 5 - гидроксиин-долукссной кислоты [3]), что косвенно свидетельствует об увеличение содержания нейромедиаторов.
Влияние хронического введения лекарственного препарата Гептрал и аминокислоты Метионин на содержание моноаминов и s-аденозилметионина в мозге крыс с гепатозомРотенко А.А., Дугин С.Ф., Крылин В.В., Агаджанян З.C.НИИ экспериментальной кардиологии ФГУ Российского кардиологическогонаучно-производственного комплекса Федерального агентствапо здравоохранению и социальному развитию, МоскваS-аденозилметионин имеется во всех живых клетках. Он образуется из метионина и АТФ. В медицине под названием «Гептрал» в качестве гепатопротектора используется органическая соль S-аденозилметионина. При остром введении у здоровых животных SAM увеличивает содержание в мозге норадреналина и серотонина. Целью данной работы являлось изучение воздействия хронического введения SAM и метионина на метаболизм моноаминов в мозге крыс на модели хронического гепатоза. Полученные данные свидетельствуют о разнонаправленном влиянии SAM и метионина на обмен моноаминов (SAM увеличивает концентрацию дофамина, серотонина и 3-МТ, а метионин - 3-МТ и ДОФУК).
›Влияние хронического введения лекарственного препарата Гептрал и аминокислоты Метионин на содержание моноаминов и s-аденозилметионина в мозге крыс с гепатозом
Влияние хронического введения лекарственного препарата Гептрал и аминокислоты Метионин на содержание моноаминов и s-аденозилметионина в мозге крыс с гепатозом
Комментариев нет:
Отправить комментарий